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2024-3-14

一、精選內(nèi)毒素更低批次細(xì)胞對內(nèi)毒素非常敏感，過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)細(xì)胞釋放炎癥因子、引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡。不僅如此，胎牛血清會經(jīng)?；蜷L時間作用于細(xì)胞，一旦內(nèi)毒素含量過高，細(xì)胞相當(dāng)于長期在“有在毒培養(yǎng)基”中生長，被內(nèi)毒素影響，細(xì)胞將處于“亞健康狀態(tài)”，進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定與準(zhǔn)確性。因此，為保證細(xì)胞的健康，在培養(yǎng)細(xì)胞時，應(yīng)該選用內(nèi)毒素含量盡可能低的血清，以保障實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。Ausbian®進(jìn)口特級胎牛血清，選擇內(nèi)毒素含量≤3EU/ml，澳洲進(jìn)口血源，曾經(jīng)是細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目...

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胎牛血清可促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的分化神經(jīng)干細(xì)胞體外分化研究是神經(jīng)科學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。有人觀察了不同濃度胎牛血清對神經(jīng)干細(xì)胞分化的影響。具體做法是：分離大鼠海馬區(qū)組織，制成單細(xì)胞懸液后，加入適量培養(yǎng)基（(含bFGF10ng／mL、EGF20ng／mLHEPES5mmol／LHeparin5mg/mL、葡萄糖23.33mmol／L、Glutamax3mmol／L、1％B27的DMEM／F12培養(yǎng)基)）培養(yǎng)，并行Nestin染色，陽性者為神經(jīng)干細(xì)胞。將第三代神經(jīng)干細(xì)胞分為三個組，A、B、C組細(xì)胞培養(yǎng)基除FBS濃度不同... 查看詳情 2020-11-24
細(xì)胞培養(yǎng)操作時，如何預(yù)防支原體的污染？細(xì)胞間發(fā)生支原體污染的風(fēng)險較高，因?yàn)槿?、試劑、?xì)胞株都可攜帶支原體。下面，筆者從預(yù)防的角度，對降低支原體污染風(fēng)險提供一些建議，供參考。1.預(yù)防人源攜帶的支原體1）應(yīng)帶帽子、口罩、手套、白大褂，應(yīng)預(yù)防個人攜帶的支原體飄散到空氣中，同時應(yīng)注意個人衛(wèi)生。2）在超凈臺上操作，必要時打開酒精燈。3）操作時盡量不說話。2.預(yù)防環(huán)境中的支原體可使用德國MB公司的支原體祛除噴霧MycoplasmaOff™或濕巾MycoplasmaOff™Wipe。該祛除劑中含有殺滅支... 查看詳情 2020-11-24
如何應(yīng)對培養(yǎng)細(xì)胞的老化？細(xì)胞老化是有時能遇到的現(xiàn)象，尤其是干細(xì)胞。它有一些表現(xiàn)，如：細(xì)胞胞漿內(nèi)特別是在核區(qū)附近出現(xiàn)黑色顆粒細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡細(xì)胞立體感逐漸消失，部分細(xì)胞呈扁平狀細(xì)胞增殖速度下降細(xì)胞貼壁能力減弱等等細(xì)胞是否老化或衰老，還可以用細(xì)胞衰老檢測試劑盒來染色，該染色主要針對細(xì)胞的β半乳糖苷酶，這是一種特異性酶，如果染色陽性，表明細(xì)胞正處于老化過程。如果預(yù)防細(xì)胞老化？下面筆者提出幾條建議，供參考。1.不要等細(xì)胞長得太滿才傳代。細(xì)胞太密會導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)下降，產(chǎn)生細(xì)胞接觸性抑制。2.細(xì)胞不要消化過度。... 查看詳情 2020-11-24
支原體污染給制藥業(yè)和科研帶來了哪些挑戰(zhàn)？支原體是真正的細(xì)菌，但它們沒有細(xì)胞壁，因此與“經(jīng)典”細(xì)菌相比，它們的多形性更高。由于支原體在細(xì)胞形態(tài)上具有可塑性，并且細(xì)胞尺寸較小，因此甚至可通過0.1μm的濾器。這也是為什么它們作為細(xì)胞培養(yǎng)衍生的生物制劑的潛在污染物而受到關(guān)注的原因之一，尤其是當(dāng)生物反應(yīng)器為支原體生長提供有利條件時。支原體在人、動物、植物和昆蟲中普遍存在，因此，在生物制藥過程中使用的任何動植物來源原料都可能含有支原體。另一方面，某些支原體通過生物膜可以在環(huán)境中長期生存。支原體檢查是生物制藥生產(chǎn)過程中質(zhì)量控制... 查看詳情 2020-11-23
人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng) 人軟骨損傷后，可用軟骨組織工程進(jìn)行軟骨缺損修復(fù)。軟骨可由間充質(zhì)干細(xì)胞分化而來。因而，間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)和分化具有重要作用。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）可以2×10的5次方／cm2的密度接種于特定的培養(yǎng)液(低糖DMEM，含15％FBS，100u/L氨卡青霉素，100mg／L鏈霉素，250mg／L兩性霉素)中，置于37℃、5％CO2和飽和濕度的孵箱內(nèi)培養(yǎng)。3天后更換培養(yǎng)液，小心棄去未貼壁細(xì)胞。以后每3天換液一次。MSC體外擴(kuò)增時，是待細(xì)胞長至鋪滿瓶底80％時，用0.1％胰蛋白酶和0.0... 查看詳情 2020-11-20
論動物細(xì)胞的灌注培養(yǎng) 動物細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)自上世紀(jì)初出現(xiàn)以來，經(jīng)歷了一個多世紀(jì)的發(fā)展，獲得了很大的進(jìn)步。不僅建立了許多細(xì)胞系和培養(yǎng)了許多類型的原代細(xì)胞，而且開發(fā)了人工合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基，并且出現(xiàn)了細(xì)胞工程，哺乳動物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)獲得了工業(yè)化的應(yīng)用，用于生產(chǎn)重組蛋白、單克隆抗體等生物藥、載體病毒、病毒性疫苗等。開發(fā)了微載體、中空纖維管和生物反應(yīng)器等，并且實(shí)現(xiàn)了一種不同以往的培養(yǎng)方式——灌注培養(yǎng)。目前，灌注培養(yǎng)已成為高產(chǎn)率培養(yǎng)細(xì)胞的主要方法。灌注培養(yǎng)有四個特點(diǎn)：一是能及時地補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)和排出代謝... 查看詳情 2020-11-20

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